Click-iT EdU-488 Cell Proliferation Detection Kit
کیت click-it EdU قابلیت تشخیص میزان تکثیر سلول بر اساس محتوای DNA تازه سنتز شده در سلول های زنده در محیط in vitro و in vivo را دارد و محدودیت های روش های رایج دیگر مثل MTT، CCK-8و BRDU رو ندارد.
تجزیه و تحلیل توانایی تکثیر سلولی یک روش ارزیابی رایج و مهم در علوم زیستی است. این روش می‌تواند تأثیر ژن‌های خاص، داروها و غیره را بر سلول‌های کشت‌شده در شرایط آزمایشگاهی (in vitro) قضاوت کند، یا توانایی رشد و تجدید سلول‌های بافت را تحت شرایط یا تحریک‌های مختلف تجزیه و تحلیل کند. در حال حاضر، روش‌های زیادی برای تشخیص تکثیر سلولی وجود دارد. اکثر آنها از برخی آنزیم‌های متابولیک تولید شده توسط سلول‌ها برای ارزیابی غیرمستقیم فعالیت تکثیر سلولی استفاده می‌کنند (مانند روش CCK-8، روش MTT و غیره)، اما برخی داروها یا وضعیت خود سلول تأثیر خاصی بر نتایج ارزیابی خواهد داشت. تشخیص مستقیم سنتز DNA در سلول‌ها برای تعیین تکثیر سلولی به عنوان دقیق‌ترین و مؤثرترین روش تشخیص شناخته می‌شود. با این حال، هم روش اولیه ترکیب نوکلئوزید نشاندار شده با رادیو اکتیو و هم بهبود بعدی روش BrdU مبتنی بر تشخیص آنتی‌بادی، محدودیت‌های خاص خود را دارند.
EdU (5-اتینیل-2'-دئوکسی‌یوریدین، 5-اتینیل-2'-دئوکسی‌یوریدین) یک آنالوگ تیمیدین حاوی یک گروه استیلن است. هنگامی که به حیوانات یا سلول‌های کشت‌شده در شرایط آزمایشگاهی تزریق می‌شود، این مولکول‌های کوچک می‌توانند به سرعت به اندام‌ها و بافت‌های مختلف نفوذ کرده و به داخل سلول‌ها نفوذ کنند و می‌توانند در طول تکثیر سلولی، تیمیدین (T) را در DNA تازه سنتز شده جایگزین کنند. گروه استیلن در مولکول EdU می‌تواند با پروب ترکیب آزید نشاندار شده با فلورسانس iF488 واکنش داده و یک حلقه تریازول پایدار را تحت کاتالیز یون‌های مس تشکیل دهد، بنابراین DNA تازه سنتز شده را می‌توان با پروب فلورسنت مربوطه نشاندار کرد. در مقایسه با روش ترکیب نوکلئوزید نشاندار شده با رادیو اکتیو، روش تشخیص EdU هیچ عامل محدودکننده‌ای مانند آلودگی رادیواکتیو ندارد. در مقایسه با روش تشخیص BrdU، روش تشخیص EdU نیازی به دناتوراسیون DNA یا واکنش آنتی‌ژن-آنتی‌بادی ندارد، که پیچیدگی آزمایش را تا حد زیادی کاهش می‌دهد و همچنین آزمایش را در زمان صرفه‌جویی، حساسیت، پایداری و دقت بیشتری می‌کند. این کیت می‌تواند برای تشخیص تکثیر سلولی در سلول‌های کشت‌شده یا بافت‌های حیوانی استفاده شود. پروب فلورسنت در این کیت فلورسانس سبز است، حداکثر طول موج تحریک ۴۹۱ نانومتر و حداکثر طول موج انتشار ۵۱۶ نانومتر است. پس از برچسب‌گذاری سلول‌های در حال تکثیر، هسته سلول فلورسانس سبز روشن نشان می‌دهد و هسته سلول به طور مشترک با رنگ هسته‌ای مرسوم مطابق برچسب‌گذاری می‌شود (این کیت رنگ هسته‌ای سلولی Hoechst 33342 را ارائه می‌دهد)، می‌توانید از میکروسکوپ فلورسانس، میکروسکوپ کانفوکال لیزری و سایر ابزارها برای مشاهده مستقیم تکثیر سلولی استفاده کنید. همچنین می‌توانید از فلوسیتومتری برای تشخیص شدت فلورسانس سلول‌های کشت‌شده در شرایط آزمایشگاهی استفاده کنید و سپس چرخه سلولی را بر اساس فعالیت تکثیر DNA با شدت فلورسانس در اواسط فاز S تعیین کنید.
محصولات مرتبط
ارسال سریع
تامین و ارسال کالا در کوتاهترین زمان ممکن
قیمت شگفت‌انگیز
بهترین قیمت
تضمین اصالت کالا
مواد تست شده
